最近瀏覽
產(chǎn)品名稱(chēng)：Easy Cloning T-vector (pEC-T)
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：
| 編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 價(jià)格 |
| HKT003-01B | Easy Cloning T-vector (pEC-T) | 20次×5 | T載體 | 2398 |
產(chǎn)品描述：
Easy Cloning T-vector是一種PCR 產(chǎn)物高效TA克隆的專(zhuān)用 T載體。它由pBluescript II KS 載體改造而成：保留了pBluescript II KS 載體全部的酶切位點(diǎn)；PCR 產(chǎn)物插入位點(diǎn)處于多克隆酶 切位點(diǎn)的中間，其兩側(cè)都有眾多的酶切位點(diǎn)可供選擇。
由于本載體以 pBluescript II KS 載體為基礎(chǔ)構(gòu)建而成，所以 它具有同pBluescript II KS 載體相同的功能：PCR 產(chǎn)物插入后可 以利用α-互補(bǔ)性進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，挑選陽(yáng)性克隆。可以用 M13 通用引物和T7，T3 啟動(dòng)子引物對(duì)PCR 產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序。含有 T7 及T3RNA 聚合酶的啟動(dòng)子，可以對(duì)插入片段進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄。
Easy Cloning T-vector (pEC-T) 產(chǎn)品包裝（A包裝）：
操作方法：
1） 選擇合適的連接體系（詳細(xì)介紹見(jiàn)背面）。
2） 取10 μL 加入至 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，用移 液槍吹打混合，冰上放置30 分鐘。
3） 將離心管置于 42℃水浴中，熱激 60-90 秒，迅 速將離心管置于冰上，放置 2-3 分鐘。
4） 向每個(gè)離心管中加入 500μL 無(wú)菌不含抗生素的 LB 或SOC 培養(yǎng)基中，37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘，使質(zhì)粒上氨芐抗性基因表達(dá)，菌體復(fù)蘇。
5） 吸取200μL 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含氨芐 青霉素的 LB 或SOC 固體平板上，用無(wú)菌涂布棒將細(xì) 胞均勻涂開(kāi)，將平板置于 37℃培養(yǎng)箱里直至液體完全 吸收，倒置培養(yǎng) 12-16 小時(shí)。
6） PCR檢測(cè)，利用試劑盒自帶的高速PCR擴(kuò)增試 劑2×FastTaq Mast Mix直接進(jìn)行菌落PCR鑒定。
