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如何更加準確的測定培養基的pH值?

發布時間:2019-08-30    瀏覽次數:7878

大多數的培養基的配方都是依據標準來做的,例如國家標準、藥典或者其他的國外標準。這些標準對培養基的pH值都有嚴格要求,一般都是控制在一個很小的范圍。所以pH值對于培養基廠家的質量控制以及客戶對培養基的驗收,都是很重要的。

校準

首先在測量pH值時,我們都會對pH計進行一個校準工作,它的校準準確率對后續的測量有很大影響。pH電極需要有規律的進行校準。每天至少校準一次,是最恰當的。

由于每支電極都有其特征性的零點和斜率,為了得到可靠和精確的結果,最少兩點校準是必不可少的。當要測量大范圍的pH值時,則需要進行至少3點校準。大多數的pH儀表可以進行3-5點校準。

同時所測量的樣品pH值落在所選擇標準液范圍之內也是非常重要的。

在電極進行校準時,最好等待緩沖液溫度在標示溫度下校準,這樣測出的pH值才是緩沖液標示的值,比如pH 6.86和pH9.12的緩沖液是表示25℃下的pH值,那么你在20℃進行校準,顯示的就不是6.86或者9.12。不過一般廠家都會附送一張緩沖液在不同溫度下測的pH值,下圖可以參考下。

標準pH計緩沖溶液對照表

用于校準的緩沖液是非常精確的溶液,擁有固定的數值和精度。緩沖液瓶開封后,為了保證校準的準確性,要注意下面事項:

1. 第一次使用緩沖液時,在包裝上標明日期,保證緩沖液包裝的密封性。 

2. 不要把使用過的緩沖液倒回原瓶,或把不同廠家的緩沖液混合在一起。 

3. 常溫下儲存緩沖液,儲存時避免陽光直射 

4. 校準前請清洗電極,不要在原瓶中直接校準 

5. 絕對不要使用過期的或污染的緩沖液 

6. 緩沖液到期應及時更換新的緩沖液

培養基pH值的測量

培養基按形態可以分為固體培養基和液體培養基。液體培養基可以選擇普通液體的pH電極,固體培養基選擇對應的固體pH電極,比如針對凝膠表面的平頭電極。如果固體培養基用液體的pH電極測量,得出的結果是沒有參考價值的。

首先在配置培養基的過程中,一定要注意配制用水一般用蒸餾水或者去離子水。否則可能對之后的pH值有影響。

其次,按照培養基廠家使用說明配置滅菌。一般培養基外包裝標簽上的pH標識表示滅菌后25℃測的pH值,所以液體培養基要待溶液溫度達到25℃時測量培養基的pH值,固體培養基等其凝固后再用專用的固體pH電極測量,同時測量的溫度也要在25度。

這里有些人可能會說我們的pH計有自動溫補功能,是不是可以不用等到25度就可以測量?

這里需要注意的是自動溫補功能只能補償電極本身,并不能補充待測溶液的溫度,所以培養基標準要求在25℃測量,那待測培養基溶液溫度就要控制在25℃左右再測。

維護

每次測量后用去離子水沖洗電極,切勿用紙擦拭電極。紙張粗糙的表面會刮劃并損壞pH敏感玻璃上的凝膠層,并且會在電極上產生靜電電荷。靜電電荷會導致測量信號非常不穩定。

測量間隙或電極短時不用,電極需要儲存在盛有專用的電極儲存液,或電解液(如:3mol/L KCl)或緩沖液pH4或pH7的容器中。確保容器中電解液液面低于電極中填充液的液面。

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