介紹動物細胞的培養過程中所需要的培養器皿和操作器皿
發布時間:2023-11-08 瀏覽次數:1215
要了解動物細胞培養的器皿,首先要了解動物細胞的培養過程。
1. 動物細胞培養的基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織,將材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用膠原蛋白酶)處理,形成分散的單個細胞,將處理后的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。
懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上,成為細胞貼壁,當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時,細胞就會停止分裂增殖,出現接觸抑制。
此時需要將出現接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理,再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外,原代培養就是從機體取出后立即進行的細胞、組織培養。
當細胞從動植物中生長遷移出來,形成生長暈并增大以后,科學家接著進行傳代培養,即將原代培養細胞分成若干份,接種到若干份培養基中,使其繼續生長、增殖。
2. 動物細胞培養需要的器皿
細胞實驗室中主要有3類常見的培養用器皿,即:培養器皿、培養操作有關的器皿、其他用品。
(1)培養器皿:根據材質,分為玻璃培養器皿、塑料培養器皿。其中,前者優點是易于細胞生長,易于清洗,可反復使用。后者優點是價格便宜,為一次性使用。目前,常見的培養器皿有3種,即:培養瓶、培養皿、多孔培養板。
培養瓶:為玻璃或塑料材質,用于培養及繁殖細胞。
將培養瓶置于95%空氣與5%CO2混合氣體的培養箱中進行培養,必要時可旋轉攪拌培養。旋轉攪拌培養可以使營養物質得到充分利用且可以使培養液獲得充足的氧氣以滿足細胞代謝的需要。
培養皿:為玻璃或塑料材質,有兩大用處,一是用于裝取、分離、處理組織,二是用于細胞毒性、單細胞分離、同位素摻入實驗。
多孔培養板:為塑料材質,用于各種檢測實驗,如細胞克隆及細胞毒性實驗。
不同顏色的多孔培養板的用途不同,如透明的培養板適用于細胞培養與比色檢測、普通光學檢測;白色的培養板適用于化學發光法檢測,底物顯色;黑色的培養板適用于熒光法檢測,觀察帶熒光蛋白標簽細胞。所有產品均以伽瑪射線滅菌處理。
(2)培養操作有關的器皿
細胞實驗室中培養操作有關的器皿主要有3種,即:貯液瓶、吸管、加樣器。
貯液瓶:用于存放或配制培養用液體,如培養液、血清及試劑等。
吸管:分為刻度吸管、無刻度吸管。前者用于吸取、轉移液體,常用規格為10ml、5ml、2ml、1ml。后者用于吸取、轉移液體,吹打、混勻及傳代細胞。
移液器:又稱“加樣器”,用于吸取、移動液體或滴加樣本。最好的是微量加樣器,吸量準確、方便,可保證實驗樣品(或試劑)含量精確,重復性良好。
另外,其他用品包括:離心管(收集細胞)、試管(放置試劑)、玻璃容器(存放吸管)、貯槽(存放小件培養物品)、凍存管(凍存細胞),以及各種注射器、燒杯、量筒、漏斗、酒精燈。
文章來源:“學甫無境”公眾號,作者~王甫榮。
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