培養細胞的生長方式及類型
發布時間:2023-12-14 瀏覽次數:1301
體外培養的細胞,按其生長方式可分為貼附型和懸浮型兩大類。
1.1 貼附生長型細胞
為附著于底物(支持物)表面生長的細胞,本書主要討論本型細胞的培養。活體體內的細胞除血細胞外,當離體培養時大多數以貼附型方式生長。必須貼附于底物才能生長的細胞稱為貼附(錨著)依賴性細胞。
目前已有很多種細胞能在體外培養生長,包括正常細胞和腫瘤細胞。例如:成纖維細胞、骨骼組織(骨及軟骨)、心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺、皮膚等組織來源細胞、神經膠質細胞、內分泌細胞、黑色素細胞及各種腫瘤細胞等。這些細胞在活體體內時,各自具有其特殊的形態;但在體外培養狀態下,其貼附生長型細胞在形態上表現得比較單一化,失去其在體內原有的某些特征。一般可將貼附生長的體外培養細胞從形態上大體分為上皮細胞型和成纖維細胞型兩類,還有一些難以確定其穩定形態的細胞。
1)、上皮細胞型(圖1-1A):細胞培養中的上皮細胞指那些形態上類似上皮細胞,其來源于外胚層及內胚層的細胞,如皮膚及其衍生物、乳腺、肝、肺泡、消化道上皮等組織的細胞,上皮性腫瘤(如鱗狀細胞癌)等的培養細胞的形態均呈上皮樣。培養中的上皮細胞形態為扁平的多角形,胞質近中央處有圓形的細胞核。其生長特點為細胞之間緊密相靠、互相接,呈“鋪路石”狀,具有連接成片的能力。
2)、成纖維細胞型(圖1-1B、C):起源于中胚層組織的細胞,如:纖維結締組織、平滑肌、心肌、血管內皮等。本型細胞的形態似在體內生長的成纖維細胞,具有長短不等的數個細胞突起,因而多呈梭形、不規則三角形或扇形,核為卵圓形位于靠近胞質的中央。其生長特點為細胞一般并不緊靠相連成片,而是排列為漩渦狀、放射狀,或柵欄狀。
上述兩種以形態分類的名稱,僅是一種籠統的提法,并不是很確切。體外培養時所謂的上皮細胞型細胞或成纖維細胞型細胞,僅是因為其形態與體內的上皮細胞或成纖維細胞類似,并不能將體外培養的這些細胞與體內同名的細胞完全等同;而且,這種名詞系用于描述細胞的外形而并非說明細胞的起源。與這兩種形態類似的細胞,可能來自不同性質的細胞亞類。取自不同組織的上皮細胞,其生化特征及其原來的形態可有差異;而來自不同組織的形態相似的成纖維細胞,其發展的趨向可能并不相同。例如:在體外培養中,可從脾臟及骨髓各自分離出形態相似的“成纖維細胞”,但是當接種這些細胞于同源的動物時,只有那些來自骨髓的“成纖維細胞”才有可能形成骨樣組織。因此,采用上皮樣細胞或成纖維細胞樣細胞的名詞似乎更為恰當。此外,體外培養細胞的形態并不完全是恒定的,可因各種因素而發生改變,包括pH、細胞密度、污染等的影響。例如:Hela細胞本身是上皮細胞型,但若培養的條件過酸或過堿,則可呈現為梭形而似成纖維細胞樣;有些細胞在高濃度血清中生長時為細長的成纖維細胞樣,在低濃度血清中則更似上皮樣。
1.2 懸浮生長型細胞
少數細胞類型在體外培養時不需要附著于底物,在懸浮狀態下即可生長,包括一些取自血、脾或骨髓的培養細胞,尤其是血液白細胞,以及癌細胞。這些細胞在懸浮中生長良好,可以是單個細胞或為微小的細胞團,觀察時細胞呈圓形。由于懸浮生長于培養液之中,因此其生存空間大,具有能夠提供繁殖大量細胞、傳代繁殖方便(只需稀釋而不需消化處理)、易于收獲細胞等優點,并且適于進行血液病的研究。缺點是不如貼附生長型觀察方便,而且并非所有的培養細胞都能懸浮生長。
來源:《細胞培養 第3版 - 劉斌;司徒鎮強》電子書 第一章第5節
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