GB 4789.4-2024沙門氏菌檢驗標準變更要點匯總
發布時間：2024-03-14 瀏覽次數：1958
來源：“六扇門Study”公眾號，作者~SIXDoors
2023年4月，GB4789.4-2024標準終于發布啦！以下是24年版沙門氏菌檢驗標準變更要點內容：
重點變更1：“乳粉樣品從混勻，改用室溫浸泡1小時后再進行預增菌”
標準修改原因：
乳粉經過高溫噴霧干燥，其中的沙門氏菌都處于受損狀態；乳粉水活度低，其中幸存的沙門氏菌適應了干燥的環境。如果乳粉在BPW中快速混勻迅速水化，受損的沙門氏菌會出現滲透壓休克；乳粉在BPW中室溫浸泡1小時緩慢水化，受損的沙門氏菌可以得到復蘇。
標準的修訂過程做了大量驗證實驗，如：人工模擬熱損傷沙門的乳粉浸泡法與混勻法比對試驗，結果表明浸泡法的檢出率更高。
自然污染了山夫登堡沙門氏菌的大豆粉，大豆粉也經過了高溫噴霧干燥，水活度較低，與乳粉類似。
結果表明，浸泡法陽性率90%， 混勻法陽性率60%，BPW 44℃預溫后再混勻的陽性率只有40%。
操作注意事項：
?將乳粉輕輕緩慢傾倒在BPW的液面；
?勿混勻勿調節pH，室溫靜置60 min±5min；
?靜置完后再混勻，培養；
?BPW勿預溫。
重點變更2：選擇性增菌培養基，采用RVS 代替 SC
標準修改原因：
亞硒酸鹽胱氨酸增菌液SC主要適用于傷寒沙門氏菌的選擇性增菌；但通過疾病監測發現，我國傷寒與副傷寒的發病率逐年下降，目前發病率為0.8 /10 萬。
然而，非傷寒沙門氏菌發病率高達560 /10 萬（《我國零售雞肉中非傷寒沙門氏菌污染對人群健康影響的初步定量風險評估20210526》），在微生物引發的食源性疾病中排前2位。
從培養基成分差異來看，RVS中含有孔雀綠，能夠抑制非沙門氏菌的生長，大豆蛋白胨有利于沙門氏菌的復蘇；SC增菌液配置需要亞硒酸氫鈉，其具有一定毒性，健康環保方面也存在安全風險，且原料不穩定，受溫度影響較大，容易變性而造成培養基功能失效 。送上兩種培養基的配方成分：
亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液：蛋白胨 5.0g，乳糖 4.0g，磷酸氫二鈉 10.0g，亞硒酸氫鈉 4.0g，L-胱氨酸 0.01g，蒸餾水 1000mL。
氯化鎂孔雀綠大豆胨（RVS）增菌液：大豆蛋白胨 4.5 g，氯化鈉 7.2 g，磷酸二氫鉀 1.26 g，磷酸氫二鉀 0.18 g，氯化鎂（含 6 個結晶水） 28.6 g，孔雀綠 0.036 g，蒸餾水 1 000 mL。
操作注意事項：
1、用RVS代替SC，BPW的接種量改為0.1mL，選擇性增菌溫度為42 ℃±1 （主要是減少帶入到RVS中的背景菌）；
2、RVS的質量很關鍵，培養基要謹慎選擇。
重點變更3：TTB選擇性增菌改為：低背景菌36 ℃±1 ℃，高背景菌42 ℃±1 ℃
標準修改原因：
1、驗證試驗發現，對于生鮮樣品，TTB 42 ℃比TTB 36 ℃的選擇性好，所以繼續沿用；
2、驗證試驗發現，對于深加工樣品，TTB 36 ℃比TTB 42 ℃生長好，所以低背景菌采用36 ℃±1 ℃培養；
3、相關權威方法，如BAM中一直有相關規定。
操作注意事項：
1、將BPW接種到TTB后，一定要混勻；
2、TTB基礎煮沸殺菌，使用當天再加碘液和煌綠；
3、絕大部分預包裝食品是低背景菌，生禽肉等初級農產品屬于高背景菌樣品；
4、背景菌不明的樣本，如PT樣品， 36 ℃±1 ℃和42 ℃±1 ℃兩個溫度同時培養。
重點變更4：預增菌培養物、選擇性培養物可4℃冷藏不超過72h
修改原因是：
1、 驗證發現，預增菌培養物、選擇性培養物4℃冷藏不超過72小時，不會影響后續檢驗。
2、 相關權威方法，如ISO 和BAM中都有相關規定。
3、減少周末加班！
