GB4789.28-2024參比培養基質控解析及圖譜——TSA篇
發布時間：2024-05-15 瀏覽次數：3860
隨著2024年年初GB4789.28-2024重磅發布，隨之各地掀起了標準學習的熱潮，參比培養基質控標準的加入，也成為了此標準的一大亮點，作為在此標準中起著絕對“標桿”作用的參比培養基，其質控方法、質控要求也受到業內同仁的一致追捧，今天小編就跟大家一起來聊一聊參比培養基的質控。文章附有培養基質控菌高清無碼圖片奧，一定要看到底！
參比培養基是為保證食品微生物檢驗用培養基的質量而存在的，凡瓊脂培養基，無論是非選擇性的還是選擇性的，其涉及生長率的測試均需用到參比培養基。參比培養基作為回收率計算的“分母”，其質量優劣對培養基的驗收工作至關重要。今天就胰蛋白胨大豆瓊脂培養基（Trypticase Say Agar,TSA)參比培養基的質控進行解析，一起來看看吧。
第一，需核對參比培養基標準配方，如圖所示；
第二，參比培養基需由具備相應檢驗能力，并取得通過國家認證認可資質檢驗機構出具的檢測報告。
第三，應滿足相關理化指標要求：外觀要求為淡黃色粉末，滅菌后為淡黃色透明膠體。PH值控制在滅菌后冷卻至25℃時7.3±0.2的范圍內。
第四，微生物指標，標準中規定的TSA參比培養基測試菌株為10株，對于參比培養基的微生物促生長檢測項目，GB4789.28中規定的質控評定標準中的要求如下：
如何操作呢？
GB4789.28-2024中原文“參比培養基具體檢驗方法可參考6.1或6.2.3”，那么6.1和6.2.3分別是什么呢？章節6.1為“非選擇性分離和計數固體培養基目標菌生長率定量測試方法”對非選擇性的參比培養基TSA具有操作上的指導意義！章節6.2.3為“非目標菌（特異性）定性測試方法”，而TSA/SDA/MRS中測試菌種均涉及其促生長能力，為相應培養基的目標菌，在此6.2.3測試方法不適用于參比培養基的測試方法。
測試方法具體操作如下：
1、工作菌懸液的制備：將標準儲備菌株、儲備菌株或工作菌株接種到非選擇性肉湯培養過夜或采用其他方法，制備10倍系列稀釋的菌懸液。進行生長率測試時，細菌和酵母菌每平板的接種水平為50CFU~250CFU，霉菌每平板的接種水平為30CFU~150CFU。
2、接種：選擇適宜稀釋度的工作菌懸液0.1mL，均勻涂布接種于待測平板和參比平板。每一稀釋度接種兩個平板。也可使用螺旋涂布法或傾注法進行接種，并按標準規定的條件培養。
【傾注法，菌落長在瓊脂內部和表面，其形態不便統一。這里不使用傾注法，而選用螺旋法，也可使用涂布法。個人覺得，傾注法的最佳使用范疇，可以在驗收平板計數法用的培養基時考慮使用此法驗收，而當培養基做為劃線分離或者涂布使用時，優先考慮涂布或螺旋法驗收培養基。】
為了直觀了解到其測試菌株在TSA參比培養基上的具體菌落形態，小編現將試驗菌落特征圖列于下表：
| 菌株名稱及編號 | 培養條件 | 接種量/cfu | 菌落特征圖 | 實驗結果 |
|---|---|---|---|---|
| 莫氏克羅諾桿菌CMCC（B）45407 | 25℃，48h | 117 |  | 生長良好，菌落黃色，圓形，表面光滑，濕潤。 |
| 大腸埃希氏菌CMCC（B）44102 | 36℃，24h | 99 |  | 生長良好，菌落灰白色，圓形，表面光滑，濕潤 |
| 金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003 | 36℃，24h | 54 |  | 生長良好，菌落淡黃色，圓形 |
| 枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501 | 36℃，24h | 71 |  | 生長良好，菌落灰白色，圓形，干燥 |
| 白色念珠菌CMCC(B）98001 | 28℃，72h | 206 |  | 生長良好，菌落白色，圓形，表面光滑，濕潤 |
| 黑曲霉CMCC(F）98003 | 28℃，72h | 39 |  | 生長良好，產黑色孢子 |
| 糞腸球菌CMCC(B)32480 | 36℃，24h | 159 |  | 生長良好，菌落白色，圓形 |
| 藤黃微球菌CMCC(B)28001 | 36℃，48h | 119 |  | 生長良好，菌落淺黃色，圓形 |
| 嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌CMCC(B)63509 | 56℃，24h | 71 |  | 灰白色，圓形，表面光滑，濕潤 |
