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假單胞菌的常規檢測分離

發布時間:2024-07-19    瀏覽次數:544

假單胞菌(Pseudomonas)是潮濕環境的典型居民,在化妝品、游泳池、熱水浴缸和鞋的內底中都有發現,導致毛囊炎、外耳炎和糖尿病足感染。大多數假單胞菌屬需氧、過氧化氫酶陽性、氧化酶陽性、革蘭氏陰性桿菌(aerobic, catalase-positive, oxidase-positive, gram-negative bacilli)。它們的代謝主要是呼吸性的,以氧為終端電子受體,很少發酵,利用精氨酸進行厭氧生長。許多假單胞菌是通過極性鞭毛運動的(polar flagella)。

如今,雖然銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)引起最大的發病率和死亡率,其他假單胞菌,雖然經常從臨床標本分離,只是偶爾參與引發疾病。銅綠假單胞菌在醫院環境中無處不在,幾乎存在于任何有水分的地方,包括醫療設備、消毒溶液和肥皂。它很少作為健康人正常菌群的一部分被發現,但在住院患者中,定植率隨著住院時間的延長而增加。銅綠假單胞菌可在燒傷、創傷和手術傷口患者中被發現,在尿路操作后,在造血系統、網狀內皮系統和淋巴系統疾病患者以及細胞或體液防御受損的患者中產生嚴重的感染。肺部感染常見于囊性纖維化(cystic fibrosis, CF)患者或機械通氣(mechanical ventilation)患者。嚴重白細胞減少患者的死亡率最高。銅綠假單胞菌產生粘液多糖、內毒素和蛋白質酶,這些酶使補體成分失活,從而在一定程度上抑制調節和炎癥反應(opsonization and the inflammatory response),并可能有助于其侵襲性。外毒素A(Exotoxin A)促進細胞損傷和組織侵襲,并對巨噬細胞有毒性。

培養中的銅綠假單胞菌的實驗室診斷常常是可疑的,因為它有葡萄狀或玉米粉的氣味,其菌落在羊血瓊脂上的粗糙或磨玻璃外觀,并且存在兩種色素中的一種或兩種:一種藍綠色熒光色素或由pyoverdin色素引起的金屬光澤。通過氧化酶反應陽性,在42°C下生長,在TSI瓊脂中進行堿性斜/中性對接反應,以及在TSI和假單胞菌P瓊脂的斜面上形成光澤或色素,可以很容易地識別出它。碳水化合物利用試驗應在O-F基礎培養基中進行,其中含有少量的蛋白胨和相對大量的碳水化合物,因此,它可以檢測到由這組細菌形成的非常少量的酸。反應通常在48小時內完成,但也可能需要長達7天的時間。與傳統鑒定方法相比,由于縮短了周轉時間和降低了費用,MALDI-TOF現在通常用于銅綠假單胞菌的鑒定。應對所有具有臨床意義的銅綠假單胞菌進行藥敏試驗。銅綠假單胞菌感染和藥敏試驗應常規進行以下藥物:β-內酰胺聯合藥物如哌拉西林-他唑巴坦(piperacillin-tazobactam)、頭孢他啶-阿維巴坦(ceftazidime-avibactam)和頭孢甲苯-他唑巴坦(ceftolozane-tazobactam)、頭孢他啶(ceftazidime)、頭孢吡肟(cefepime)、氨曲南(aztreonam)、碳青霉烯類藥物(carbapenems)、氨基類苷類藥物(aminoglycosides)和氟喹諾酮類藥物(fluoroquinolones)。銅綠假單胞菌對阿莫西林-克拉維酸鹽(amoxicillin-clavulanate)、頭孢曲松(ceftriaxone)、TMP-SMX和四環素(tetracyclines)以及較新的廣譜抗生素厄他培南和替加環素(newer broad-spectrum antibiotics ertapenem and tigecycline)具有內在耐藥性。銅綠假單胞菌的醫院菌株可能對許多種類的抗生素具有耐藥性,并且多重耐藥銅綠假單胞菌的發病率正在增加,特別是在重癥監護病房和長期患有假單胞菌感染的患者中,例如患有CF和其他慢性綜合征的患者。當遇到耐藥分離株時,通常對粘菌素和多粘菌素B(polymyxin B)進行額外的藥敏試驗。

Figure 1. Gram stain of Pseudomonas aeruginosa (Derived from McPherson, R. A., & Pincus, M. R. 2021)

參考文獻:McPherson, R. A., & Pincus, M. R. (2021). Henry's clinical diagnosis and management by laboratory methods E-book. Elsevier Health Sciences.

來源:微生物安全與健康網
鏈接:https://www.mbiosh.com/column/testing-technology/testing-technology-method/27606

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