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菌落總數計數規則系列——第一篇:食品國標

發布時間:2024-03-11    瀏覽次數:9302

眾所周知,不同行業有其各自的標準要求和檢驗技術規范,對于微生物檢測而言,同是菌落總數的檢測,處于不同的行業標準中,菌落總數的計算方法可能不盡相同。接下來,讓我們一起來盤點一下不同行業中微生物菌落總數平板計數方法吧!

縱觀以上數據特點,已基本涵蓋在微生物檢驗工作中菌落總數平板計數法最終結果可能出現的各種數據類型(圍繞適宜計數范圍30~300分布的情況)。現就GB4789.2-2022標準中的計數方法和計數規則進行比較、分析。

我們先來看幾組數據,感興趣的小伙伴可以試著做一下奧

按照食品GB4789.2中的計數規則,以上數據給出的結果分別是:

第①組:結果報<1乘以最低稀釋倍數,則為<10cfu,如果液體原液未生長,則報<1cfu

第②組:應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數計算,即14.5×10=145(cfu),修約后報為150cfu或1.5×102cfu。不少小伙伴問,倘若這里為液體原液的菌數14、15則結果怎么報?——取平均數14.5,按照7.2.2采用兩位有效數字(以下各組均要求兩位有效數字,后面不在贅述),則為15cfu。

如果是4、5呢?兩位有效數字為4.5,如何報告結果?小編認為,為了直觀理解每1mL中有多少個菌,4個半菌則不妥,不妨進行四舍五入,報5cfu即可,這也是遵循7.2.1中“菌落總數小于100cfu時,按四舍五入原則修約,以整數報告”的規則。

第③組:所有稀釋度的平板菌落數均大于300cfu,對稀釋度最高的平板進行計數,結果按平均菌落數乘以最高稀釋倍數計算。(442+420)×103=431000,科學計數法修約為4.3×105cfu。這里需要關注的一個問題是需要兼顧到產品要求的微生物限度問題。如果實驗做到1:1000的稀釋級,結果仍為多不可計,而微生物要求的限度極高,譬如某些人為添加有益菌產品(要求不低于106甚至更多,那么這里僅憑1:1000稀釋級上多不可計顯然不能說明產品是否符合規定要求,需要我們繼續加大稀釋倍數,直至可以在平板上進行計數,以達到能評定產品是否符合標準規定數量的要求。

第④組:只有一組數據落在適宜計數范圍之內,這個毋庸置疑,菌落平均數為,修約報為1.3×104cfu

第⑤組:兩個連續稀釋度的平板菌落數在適宜計數范圍內,標準中也已經明確給出了的計算公式,這里套用一下:,修約后并采用科學計數法報2.5×104cfu

第⑥組:所有稀釋度平板菌落數皆不在30-300cfu之間,以最接近30cfu或300cfu的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。按照標準中給出的示例,312、306與300的接近程度,14、19與30的接近程度,無論是做差還是直觀感覺上前者更為接近。那么如何科學地比較其接近程度呢,在接下來的第7組我們繼續剖析。此組菌落總數計算為cfu,報出為3.1×103cfu

第⑦組:此組數據是在第⑥組的基礎上小編進行了調整,那么結果那組是接近300或30的稀釋級呢?

顯然我們很難直觀看出哪組數據更接近,若做差,則312-300=12(Δ1),306-300=6(Δ2);30-27=3(Δ3),30-25=5(Δ4),比較差值,則顯然后者差值更小(Δ3Δ4均值小于Δ1Δ2均值)。那么就能說明其與30更為接近嗎?因為二者為不同的稀釋級,其參考的比較對象基數30、300本身也存在10倍關系,直接比較差值Δ之間大小,不科學。為了規避這種不同參考基數組別之間的比較,小編認為可引入相對誤差δ算法,如  ,

相對誤差越小(δ1與δ2的均值小于δ3與δ4的均值),則與300或30越接近。因此此組菌落總數計算為cfu,報出為3.1×103cfu

第⑧組:兩個連續稀釋度的平板,其中一組完全落在適宜計數范圍內,而另一組部分落在適宜計數范圍內,應按照7.1.2公式計算。標準原文解釋如下:

這里小編認為分子取的是含適宜范圍菌落數的平板菌落數之和,那么分母n1、n2應解釋為“n1:含適宜范圍菌落數的第一稀釋度平板個數;n2:含適宜范圍菌落數的第二稀釋度平板個數。”較為妥當。計算:修約為2.9×103cfu。

第⑨組:有了前面的運算,第9組也迎刃而解,小伙伴們的結果是多少呢,且看小編的運算,如下:,修約為3.0×103cfu。

第⑩組:只有一個稀釋級的部分數據在適宜計數范圍內,這類結果該如何計算呢?各位小伙伴,請在留言區留下您的結果和理由吧!




 

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