GB4789.28—2024參比培養基質控解析及圖譜—SDA篇
發布時間:2024-05-22 瀏覽次數:1384
前面已經與大家分享了TSA參比培養基的質控解析及相應的圖譜,同樣,SDA參比培養基在國標GB4789.28中對酵母菌、霉菌培養用的培養基質控有著同等重要地位,今天大家就跟隨小編的腳步一起來看一下作為參比培養基的SDA,其質控解析及相應圖譜吧!
沙氏葡萄糖瓊脂(Sabouraud Dextrose Agar Medium,SDA)參比培養基,其質控分四步走。
第一,核對配方成分,應與標準一致。即符合如下表配方:
蛋白胨 | 5.0g |
酪蛋白胨 | 5.0g |
葡萄糖 | 40.0g |
瓊脂 | 15.0g |
第二,使用者審核參比培養基檢測報告,是否由具備相應檢驗能力,并取得通過國家認證認可資質檢驗機構出具的檢測報告。
第三,理化指標應滿足的條件如下:
① 肉眼觀察,并記錄干燥培養基粉末顏色:淡黃色粉末。
② 滅菌后溶液顏色、透明度:滅菌后為淡黃色透明膠體。
③ PH測試,121℃高壓滅菌15min后,傾倒平板,待凝固平衡至25℃時測定,應為5.6±0.2℃。
④ 凝膠強度測試,SDA培養基制成平板或斜面,冷凝后用10μL接種環在其上劃線,普通平板可采用三區/四區劃線法,斜面采用之字形劃線法,觀察劃線過程中的破裂情況,要求劃線不破。
第四,最最關鍵的微生物學促生長能力,應滿足在規定的培養和時間內,生長良好且符合相應的菌落形態特征。
微生物學促生長能力試驗方法參照下面方法:
Step1、將白色念珠菌、釀酒酵母接種到非選擇性液體培養基(如沙氏葡萄糖液體培養基、馬鈴薯葡萄糖液體培養基等)培養或使用非選擇性培養基平板/斜面(普通SDA、PDA等)進行培養。將培養后渾濁的菌液進行10倍系列稀釋。平板或斜面菌苔則刮取一定量進行稀釋(這種操作很大程度依賴于檢驗員的經驗)。黑曲霉、桔青霉、產黃青霉接種于裝有上述瓊脂培養基的羅氏瓶或者較粗試管中,鋪成斜面,進行涂布或劃線,培養過程中保持良好的透氣性,且不污染環境,進行培養,直至長出豐富的孢子。將孢子進行洗脫,之后進行10倍系列稀釋。選取適宜的稀釋級(要求酵母菌每0.1ml菌含量50—250cfu,霉菌每0.1ml菌液其菌含量在30—150cfu)。
Step2、選擇適宜稀釋度的工作菌懸液0.1mL,涂布或螺旋接種于測試平板上,每稀釋度做兩個平板。按標準規定的條件培養,觀察并記錄。
為了讓大家更形象直觀的看到以上五種菌在SDA參比培養基上的具體形態,小編使用環凱自主研發生產的SDA參比培養基,測試菌株在SDA參比培養基上的高清無碼圖見下表(以下圖片均為環凱原創,轉載或引用請注明出處)
附表:測試菌株在SDA參比培養基上的菌落形態
菌株名稱及編號 | 培養條件 | 接種量/cfu | 菌落特征圖 | 實驗結果 |
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黑曲霉CMCC(F)98003 | 28℃,72h | 40 | ![]() | 生長良好,白色菌絲,黑色孢子 |
白色念珠菌CMCC(F)98001 | 28℃,72h | 113 | ![]() | 生長良好,白色圓形菌落 |
釀酒酵母CMCC(F)98018 | 28℃,72h | 72 | ![]() | 生長良好,奶油色圓形菌落 |
桔青霉CMCC(F)98028 | 28℃,72h | 141 | ![]() | 生長良好,白色菌絲,綠色孢子 |
產黃青霉CMCC(F)98801 | 28℃,72h | 67 | ![]() | 生長良好,白色菌絲,綠色孢子 |
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