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GB4789.28—2024參比培養基質控解析及圖譜—SDA篇

發布時間:2024-05-22    瀏覽次數:1384

前面已經與大家分享了TSA參比培養基的質控解析及相應的圖譜,同樣,SDA參比培養基在國標GB4789.28中對酵母菌、霉菌培養用的培養基質控有著同等重要地位,今天大家就跟隨小編的腳步一起來看一下作為參比培養基的SDA,其質控解析及相應圖譜吧!

沙氏葡萄糖瓊脂(Sabouraud Dextrose Agar Medium,SDA)參比培養基,其質控分四步走。

第一,核對配方成分,應與標準一致。即符合如下表配方:

蛋白胨5.0g
酪蛋白胨5.0g
葡萄糖40.0g
瓊脂15.0g

第二,使用者審核參比培養基檢測報告,是否由具備相應檢驗能力,并取得通過國家認證認可資質檢驗機構出具的檢測報告。

第三,理化指標應滿足的條件如下:
      ① 肉眼觀察,并記錄干燥培養基粉末顏色:淡黃色粉末。
      ② 滅菌后溶液顏色、透明度:滅菌后為淡黃色透明膠體。
      ③ PH測試,121℃高壓滅菌15min后,傾倒平板,待凝固平衡至25℃時測定,應為5.6±0.2℃。
      ④ 凝膠強度測試,SDA培養基制成平板或斜面,冷凝后用10μL接種環在其上劃線,普通平板可采用三區/四區劃線法,斜面采用之字形劃線法,觀察劃線過程中的破裂情況,要求劃線不破。

第四,最最關鍵的微生物學促生長能力,應滿足在規定的培養和時間內,生長良好且符合相應的菌落形態特征。

微生物學促生長能力試驗方法參照下面方法:

Step1、將白色念珠菌、釀酒酵母接種到非選擇性液體培養基(如沙氏葡萄糖液體培養基、馬鈴薯葡萄糖液體培養基等)培養或使用非選擇性培養基平板/斜面(普通SDA、PDA等)進行培養。將培養后渾濁的菌液進行10倍系列稀釋。平板或斜面菌苔則刮取一定量進行稀釋(這種操作很大程度依賴于檢驗員的經驗)。黑曲霉、桔青霉、產黃青霉接種于裝有上述瓊脂培養基的羅氏瓶或者較粗試管中,鋪成斜面,進行涂布或劃線,培養過程中保持良好的透氣性,且不污染環境,進行培養,直至長出豐富的孢子。將孢子進行洗脫,之后進行10倍系列稀釋。選取適宜的稀釋級(要求酵母菌每0.1ml菌含量50—250cfu,霉菌每0.1ml菌液其菌含量在30—150cfu)。

Step2、選擇適宜稀釋度的工作菌懸液0.1mL,涂布或螺旋接種于測試平板上,每稀釋度做兩個平板。按標準規定的條件培養,觀察并記錄。

為了讓大家更形象直觀的看到以上五種菌在SDA參比培養基上的具體形態,小編使用環凱自主研發生產的SDA參比培養基,測試菌株在SDA參比培養基上的高清無碼圖見下表(以下圖片均為環凱原創,轉載或引用請注明出處

附表:測試菌株在SDA參比培養基上的菌落形態

菌株名稱及編號 培養條件 接種量/cfu 菌落特征圖 實驗結果
黑曲霉CMCC(F)9800328℃,72h40黑曲霉CMCC(F)98003 生長良好,白色菌絲,黑色孢子
白色念珠菌CMCC(F)9800128℃,72h113白色念珠菌CMCC(F)98001 生長良好,白色圓形菌落
釀酒酵母CMCC(F)9801828℃,72h72釀酒酵母CMCC(F)98018 生長良好,奶油色圓形菌落
桔青霉CMCC(F)9802828℃,72h141桔青霉CMCC(F)98028 生長良好,白色菌絲,綠色孢子
產黃青霉CMCC(F)9880128℃,72h67 生長良好,白色菌絲,綠色孢子

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