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潔凈手術室作為醫院感染防控的關鍵環節，其空氣微生物濃度的穩定性直接關系手術安全與患者預后。然而，在實際運行中，因運維管理疏漏、人員操作不規范及凈化空調系統長期運行導致的過濾器性能衰減等問題，可能引發潔凈度參數偏離設計標準，增加術后感染風險。因此，定期開展浮游菌監測是維持潔凈環境的核心措施之一。
我們推薦使用環凱牌浮游微生物采樣器（HKM-IIIB）對手術室進行采樣，HKM-IIIB型浮游微生物采樣器是一種高效的多孔吸入式浮游微生物采樣器。該設備基于Andersen撞擊原理，等效6級，撞擊速度達20m/s，可高效捕獲≥1μm的微生物顆粒，采樣效率≥95%。采集頭口風速與潔凈室內風速一致，確保微生物濃度檢測的準確性。采集樣本時，空氣攜帶顆粒高速撞擊在培養皿內的培養基表面，培養基為細菌創造了保持活性的最佳環境，保證了測定結果精確可靠。
其核心優勢包括：
1，等速采樣設計：采集口風速與潔凈室風速一致，確保微生物濃度檢測準確性；
2，智能功能：3.5寸觸控屏支持采樣量10-6000L、采樣地點代碼等參數設置，并通過手機藍牙遠程控制；
3，數據可追溯性：自動存儲8000條記錄，支持電腦端數據導出；
4，自動流量補償：誤差≤2%，避免因培養皿差異導致的數據偏差。
采樣準備工作如下：
1、被測試手術室（潔凈室）溫、濕度須達到規定的要求；靜壓差、換氣次數、空氣流速必須控制在規定值內。
2、對單向流測試應在凈化空調系統正常運行不少于10min；非單向流不少于30min后開始。
3、靜態測試時，室內人員不多于2人。采樣時測試人員應在采樣口下風側，并避免遮擋氣流。
4、測試人員應按無菌操作規程進行。采樣口、培養皿及操作工具需用75%乙醇擦拭消毒，消毒后空置≥5min。
5、測試人員必須穿戴符合潔凈級別的潔凈服。
6、浮游菌測試前，被測手術室（潔凈室）已經過消毒，且消毒后靜置≥15min。
以上準備好時，我們使用HKM-IIIB采樣器采樣步驟：
1、在有平臺的潔凈室內編制培養皿（XX潔凈室，XX測點），操作前應用浸濕75%乙醇的醫用脫脂棉花擦拭平臺。測試人員雙手用同樣方法嚴格消毒。在編制過程中再次仔細檢查培養基平皿的質量，有變質、破損或污染不能使用。
2、用浸濕75%乙醇的醫用脫脂棉花擦拭采樣器的采樣口、采樣管、采樣器的頂蓋、轉盤及罩子內外表面，擦拭后靜置≥1min待乙醇揮發。
3、采樣器經消毒后不放入培養皿，啟動儀器空轉運行不少于5min（流量100L/min），使儀器中的殘余消毒劑蒸發，并校準流量傳感器。
4、根據手術室的潔凈度級別設定采樣量，采樣器的流量（100L/min）X 采樣時間（min）= 采樣量（L）。最小采樣量如下：
? 百級（ISO 5級）：≥1000L
? 千級（ISO 6級）：≥500L
? 萬級（ISO 7級）：≥250L
5、放入培養皿，蓋上蓋子后調節采樣器縫隙高度。采樣操作時，培養皿應輕拿輕放，用“五指抓拿”培養皿外徑，盡量避免人為對樣本造成污染。
6、采樣點的布置及采樣點數量：測點位置離地面0.8m~1.5m；送風口測點位置離開送風口面0.3m左右。最少采樣點數如下：
● 百級（ISO 5級）：≥5點（按房間對角線5點法布置）
● 千級（ISO 6級）：≥4點（按房間中心+四角法布置）
● 萬級（ISO 7級）：≥3點（按房間中心三角法布置）
7、正式啟動HKM-IIIB采樣器
1、按觸控屏“采樣鍵”或通過手機藍牙小程序進入參數設置界面，屏幕默認顯示最近一次采樣參數（含采樣量、地點代碼、延遲時間）。
2、按“選擇鍵”切換至目標參數組（支持99組預存方案），通過上下鍵調整采樣量（10-6000L）、采樣延遲時間（0-60min）及地點代碼（如“OR-3-1”代表3號手術室1號點）。
3、確認參數后，按“啟動鍵”開始采樣：
? 采樣延遲倒計時結束后，儀器自動運行（屏幕實時顯示剩余采樣量及進度條）；
? 到達設定采樣量后，泵機自動停止，數據（含時間、地點、溫濕度）存儲至本地（支持8000條）并同步至手機端；
? 若需中途停止，長按“暫停鍵”2秒，數據仍自動保存。
8、培養
★ 8.1，將采樣后的培養皿輕放于無菌平臺，倒置放置，用滅菌記號筆標注采樣點信息（如“OR-3-1-20231001”）。
★ 8.2，使用高壓滅菌牛皮紙包裹培養皿（單層包裝），裝入專用消毒轉運盒，于2-8℃避光保存。
★ 8.3，在生物安全柜內，雙手經75%乙醇消毒后，將培養皿倒置于恒溫培養箱（35℃±1℃）培養48±2小時。
9、菌落計算
9.1 計數方法：
● 肉眼初判：在自然光下統計菌落數（直徑≥0.5mm）；
● 輔助復檢：使用環凱SmartCounter Pro菌落計數儀（5-10倍放大+AI識別），自動標記重疊菌落（如2個菌落重疊仍計為2個）；
● 爭議處理：兩名檢測員獨立計數，差異＞10%時重新判讀。
9.2 填寫《浮游菌檢測記錄表》（含以下字段）：
● 采樣時間、地點、潔凈度等級；
● 采樣量（L）、菌落數（CFU）、計算濃度（CFU/m3）；
● 操作人員簽名及審核人確認。
10、結果計算
浮游菌濃度計算公式：濃度（CFU/m3）= 菌落數（CFU） / 采樣量（m3）
注：1m3=1000L，若采樣量為1000L，則直接取菌落數為濃度值（例：菌落數5 → 5 CFU/m3）。
注意：
1)、每個測點的浮游菌平均濃度必須低于所選的評定標準中關于細菌濃度的界限。
2)、若某測點的浮游菌平均濃度超過評定標準, 則必須對此區域先行消毒, 然后重新采樣兩次。再次測試結果必須合格。
