金黃色葡萄球菌（S. aureus）作為常見的食源性致病菌，每年引發全球數百萬例食物中毒事件。傳統培養法需耗時24~48 h，難以滿足快速檢測需求。本研究開發了一種基于抗菌肽與IgG雙識別機制的磁珠比色檢測法，60 min內即可實現復雜樣本中S. aureus的精準檢測。
金黃色葡萄球菌的檢測策略
通過示意圖闡明雙識別磁珠比色法的核心機制：①磁分離富集階段，抗菌肽修飾磁珠特異性捕獲金黃色葡萄球菌；②雙識別標記階段，適配體功能化納米酶靶向結合細菌表面蛋白，形成“磁珠-細菌-納米酶”復合物；③比色檢測階段，復合物催化顯色底物（TMB）產生藍色產物，通過顏色梯度或吸光度定量菌濃度（靈敏度達60 CFU/mL）。
圖1 基于MBs-BW和HRP-porcine IgG的S. aureus檢測策略示意圖
條件優化
通過系統優化（圖2），研究確定了20 μL MBs-BW、10 μL HRP-豬 IgG及60分鐘一步法孵育為最佳條件，在保證檢測效率的同時將操作時間縮短至傳統分步法的50%。
圖2 實驗條件優化結果
性能分析
實驗數據顯示（圖3），該方法在1.0×102–1.0×107 CFU/mL范圍內呈現良好線性（R2=0.9897），檢測限低至60 CFU/mL，較文獻報道的多數免疫分析法提升1個數量級（表1）。
圖3 分析性能驗證
特異性分析
特異性驗證（圖4）表明，8種常見干擾菌的交叉反應率均低于7.3%，混合菌存在時檢測誤差僅4.2%，證實了雙識別機制對革蘭氏陽性菌群的高區分能力。
圖4 特異性測試結果
結論：通過圖片與數據的結合，本研究成功展示了一種基于磁珠分離和雙識別探針的比色法，兼具高靈敏（60 CFU/mL）、強特異性（干擾度<7.3%）和快速檢測（<2小時）的優勢，為復雜樣本中S. aureus的快速篩查提供了新策略。
DOI: 10.1007/s00216-025-05862-8
來源：微生物安全與健康網，作者~占英。
