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食品中金黃色葡萄球菌檢測

發布時間:2014-06-20      瀏覽次數:9281    分享:

  金黃色葡萄球菌檢測在食品行業中至關重要。金黃色葡萄球菌是人類的一種重要病原菌,隸屬于葡萄球菌屬,有“嗜肉菌"的別稱,是革蘭氏陽性菌的代表,可引起許多嚴重感染。而對于金黃色葡萄球菌在速凍食品中的存在量,衛生部公布食品安全國家標準《速凍面米制品》,允許金葡菌限量存在,也對金黃色葡萄球菌檢測做了相關規定。

實驗設備耗材

  吸管(1ml、10ml)、恒溫培養箱(36±1℃)、冰箱、均質器、振蕩器、平皿、稀釋瓶、天平、顯微鏡、接種棒等

培養基和試劑

  金黃色葡萄球菌檢測需要用到試劑為:普通肉湯培養基、胰蛋白胨大豆肉湯、Baird-Prker瓊脂平板、緩沖蛋白胨水(BP)、凝固酶試驗凍干血漿

檢驗程序(非選擇性增菌法)

  檢樣25g+225mlBP胨水

  10ml勻液+10ml雙料胰胨肉湯

金黃色葡萄球菌檢測操作步驟

  1.稱取25g固體樣品;吸取25mL液體樣品,加入225mLBP胨水,固體樣品研磨或置均質器中制成混懸液。

  2.吸取10mL上述混懸液,接種于10mL雙料胰蛋白胨大豆肉湯中,置36±1℃培養2h。

  3.再加入20ml 含20%NaCl的單料胰蛋白胨大豆肉湯,置36±1℃培養24±2h。

  4.劃線轉種2個表面干燥的Baird-Parker瓊脂平板上,36±1℃培養46±2h。

  5.挑取可疑菌落移種到肉湯培養基中,置36±1℃溫箱培養24h。

  6.取肉湯培養物0.3ml同0.5ml凝固酶試驗凍干血漿于8mm*100mm試管內充分混合,置36±1℃培養,定時觀察是否有凝塊形成,至少觀察6h,以內容物完全凝固,使試管倒置或傾斜時不流動為陽性。試驗中需同時做已知陽性和陰性對照。對可疑結果,應進行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗。

  7.本菌為革蘭氏陽性球菌,排列是葡萄球狀,無芽胞,無莢膜,致病性葡萄球菌菌體較小,直徑約為0.5~1μm。在Baird-Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤、直徑為2~3mm,顏色呈灰色到黑色,邊緣為淡色,周圍為一混濁帶,在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度,偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落;但無混濁帶及透明圈。

  8.報告結果,如發現有凝固酶試驗陽性的菌落,即報告1g(ml)食品中有金黃色葡萄球菌存在,否則為陰性。

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