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我公司針對目前乳制品行業及質量監測單位檢驗阪崎腸桿菌的需求及情況，對阪崎腸桿菌檢驗相應的技術改進，使得阪崎腸桿菌檢出率較之前有很大的改進。擴充并完善了相關的微生物檢測試劑，使得技術操作人員能更準確、快捷的檢測出目標菌。
方案一：傳統微生物檢測法
依據GB 4789.40-2016食品衛生微生物學檢驗克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌）檢驗，推出成套的阪崎腸桿菌檢驗解決方案，為生產企業及檢驗單位提供方便。
第一法 克羅諾桿菌屬定性檢驗 操作步驟
1.1 前增菌和增菌 取檢樣100 g（mL）加入已預熱至44 ℃裝有900 mL 緩沖蛋白胨水的錐形瓶中，用手緩緩地搖動至充分溶解，36 ℃±1 ℃培養18 h±2 h。移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養24 h±2h。
1.2 分離 1.2.1 輕輕混勻mLST-Vm 肉湯培養物，各取增菌培養物1 環，分別劃線接種于兩個阪崎腸桿菌顯色培養基平板，36 ℃±1 ℃培養24 h±2 h。 1.2.2 挑取至少5個可疑菌落，劃線接種于TSA 平板。25 ℃±1 ℃培養48 h±4 h。
1.3 鑒定 自TSA 平板上直接挑取黃色可疑菌落，進行生化鑒定。克羅諾桿菌屬的主要生化特征見表2。可選擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統。
克羅諾桿菌屬的主要生化特征
生化試驗 | 特征 | |
黃色素產生 | + | |
氧化酶 | - | |
L-賴氨酸脫羧酶 | - | |
L-鳥氨酸脫羧酶 | （+） | |
L-精氨酸雙水解酶 | + | |
檸檬酸水解 | （+） | |
發酵 | D-山梨糖 | （-） |
L-鼠李糖 | + | |
D-蔗糖 | + | |
D-蜜二糖 | + | |
苦杏仁甙 | + | |
注：+＞99%陽性： -＞99%陰性；（+）90%-99%陽性；（-） | ||
1.4 結果與報告 綜合菌落形態和生化特征，報告每100 g（mL）樣品中檢出或未檢出克羅諾桿菌屬。
第二法 克羅諾桿菌屬的計數 操作步驟
2.1 樣品的稀釋 2.1.1 固體和半固體樣品：無菌稱取樣品100 g、10 g、1 g 各三份，加入已預熱至44 ℃分別盛有900 mL、90 mL、9 mL BPW 中，輕輕振搖使充分溶解，制成1:10 樣品勻液，置36 ℃±1 ℃培養18 h±2 h。分別移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養24 h±2 h。 2.1.2 液體樣品：以無菌吸管分別取樣品100 mL、10 mL、1 mL 各三份，加入已預熱至44 ℃分別盛有900 mL、90 mL、9 mL BPW 中，輕輕振搖使充分混勻，制成1:10 樣品勻液，置36 ℃±1 ℃培養18h±2h。分別移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養24 h±2 h。
2.2 分離、鑒定 同1.2，1.3。
2.3 結果與報告 綜合菌落形態、生化特征，根據證實為克羅諾桿菌屬的陽性管數，查MPN 檢索表，報告每100 g（mL）樣品中克羅諾桿菌屬的MPN 值（見國標附錄Ｂ中表B.1）。
實驗操作所用培養基及生化試劑
功能階段 | 實驗 | 產品序號 | 產品名稱 | 規格 | 類別 |
前增菌 | 1 | 023130 | 緩沖蛋白胨水（BPW） | 250g | 瓶（干粉） |
CP0560A | 緩沖蛋白胨水（BPW） | 9 ml×20支 | 盒（管裝） | ||
增菌 | 2 | 022212 | 改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯基礎（MLST） | 250g | 瓶（干粉） |
SR0180 | 萬古霉素（改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯配套試劑） | 1 ml×10支 | 盒（西林瓶） | ||
CP0750 | 改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（MLST-Vm） | 10 ml×20支 | 盒（管裝） | ||
平板分離 | 3 | CRM006 | 阪崎腸桿菌顯色培養基（DFI） | 1000 mL | 瓶（干粉） |
CRM006B | 阪崎腸桿菌顯色培養基（DFI） | 90mm×20 | 盒（平板） | ||
生化鑒定 | 4 | 024072 | 胰蛋白胨大豆瓊脂培養基(大豆消化酪素瓊脂培養基)TSA | 250g | 瓶（干粉） |
024079 | 胰蛋白胨大豆瓊脂培養基(大豆消化酪素瓊脂培養基)TSA | 90mm×20 | 盒（平板） | ||
5 | 029170 | 氧化酶試紙 | 10片/盒 | 盒 | |
6 | 075280 | L-賴氨酸脫羧酶培養基 | 20支 | 盒（西林瓶） | |
075290 | 氨基酸脫羧酶對照 | 20支 | 盒（西林瓶） | ||
7 | 075270 | L-鳥氨酸脫羧酶培養基 | 20支 | 盒（西林瓶） | |
8 | 075590 | L-精氨酸雙水解酶培養基 | 20支 | 盒（西林瓶） | |
075600 | 精氨酸雙水解酶對照 | 20支 | 盒（西林瓶） | ||
9 | 029110 | 無菌液體石蠟 | 10 mL×1支 | 瓶 | |
10 | 075090 | D-山梨醇 | 20支 | 盒（西林瓶） | |
11 | 075110 | L-鼠李糖 | 20支 | 盒（西林瓶） | |
12 | 075050 | D-蔗糖 | 20支 | 盒（西林瓶） | |
13 | 075560 | D-蜜二糖 | 20支 | 盒（西林瓶） | |
14 | 022120 | 西蒙氏檸檬酸鹽培養基 | 250 g | 瓶（干粉） | |
15 | 071870 | 阪崎腸桿菌生化鑒定盒 | 11種×10支 | 盒（西林瓶） |
不同培養基下菌種顯現出不同的菌落形態（菌株：阪崎腸桿菌 ATCC29544）
